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本制品是在Dpnl与SgeI基础上开发得到的具有更好的质粒消化效果的一款酶。该酶通过按一定比例将Dpnl与Sgel混合得到。由于DpnI切割Dam+的底物，SgeI切割Dcm+的底物，二者混合以后可以相互弥补，从而提高对质粒的消化效率。

DpnI需要在识别序列中存在N6-甲基腺嘌呤，才能切割DNA。从Dam+菌株纯化的DNA将是DpnI的底物。DpnI只能切割完全腺甲基化Dam位点。半腺甲基化Dam位点的DpnI切割速度慢60倍。SgeI可切割在单链或双链DNA上含有5-甲基胞嘧啶的DNA靶标。通过Dcm或CpG甲基转移酶甲基化的DNA将成为SgeI的底物。为实现有效切割，至少需要复制两个SgeI识别序列。甲基化DNA完全酶切所需的酶量取决于SgeI识别位点的数量。因此，将DpnI与SgeI通过一定比例混合，可以覆盖更多的使用场景，兼顾更多的宿主类型，提高点突变的灵活性。

经验证，本制品对于不同类型的模板，质粒残留率仅为DpnI的10～20%，仅为SgeI的0.1～1%。同时该酶可以适应常规PCR反应Buffer，从而可以在扩增完成后直接进行消化。

• 功能检测：用1μL 质粒DNA消化酶消化pUC19点突变产物，蓝白斑筛选显示消化后背景斑比例<2%。
  
• 内切酶残留检测：将1μL 质粒DNA消化酶与质粒底物（Dam-，Dcm-）在37℃温育4h，通过DNA电泳检测质粒底物无变化。
  
• 非特异性DNase残留检测：将1μL 质粒DNA消化酶与双链DNA底物在37℃温育1h，通过DNA电泳检测双链DNA底物无变化。

• 于冰上配制如下反应体系：
  

  成分	用量
  PCR产物	X μL
  质粒DNA消化酶	1μL
  Nuclease-Free Water	至20μL

  • PCR产物用量可根据扩增产物量灵活选择，产物多则减少用量，产物少则增加用量。
    
  • 对于常规PCR Buffer，本制品可以良好适应，对于一些盐离子浓度高的PCR Buffer，建议在反应时减少PCR产物用量，一般不超过反应体积的1/2。
• 涡旋混匀，瞬离；
  
• 37℃温育15min；
  
• 反应结束后，可以直接用于转化，或者-20℃保存备用。